Colleen Wolstenholme est née à Antigonish, en Nouvelle-Écosse, en 1963. C’est au cours de son premier semestre en stylisme de mode au Nova Scotia College of Art and Design (NSCAD) qu’elle découvre les arts visuels et décide d’en faire sa profession. Après avoir terminé son baccalauréat en arts plastiques en 1986, elle poursuit ses études à la State University of New York à New Paltz, où elle obtient une maîtrise en 1992. Finaliste du prix Sobey en 2002, elle a enseigné au NSCAD, à la State University of New York et au Minneapolis College of Art and Design. De nombreuses expositions solos lui ont été consacrées, notamment au Musée d’art du Centre de la Confédération, à Charlottetown, à l’Art Gallery of Calgary et à l’Encomium Contemporary Art de Toronto. Wolstenholme a aussi participé à de nombreuses expositions collectives, entre autres à l’Art Gallery of Nova Scotia, à la Real Art Ways de Hartford, au Connecticut, à la Horse Hospital Gallery de Londres, ainsi qu’au ProjectGreen, à Brooklyn. On trouve de ses œuvres dans d’importantes collections muséales, dont l’Art Gallery of Nova Scotia, le Musée d’art du Centre de la Confédération, le Musée des beaux-arts de Montréal et le Musée des beaux-arts du Canada. Colleen Wolstenholme vit et travaille à Hansport, en Nouvelle-Écosse.